猫自发性纤维肉瘤（Feline Fibrosarcoma, FFS）是猫常见的软组织恶性肿瘤，尤其多发于肩胛区域和注射部位。尽管手术切除结合放疗（如使用铱-192近距离放疗）被认为是现行的标准治疗方案，这些肿瘤的复发率依然高达60%以上，常发生在原位。此外，治疗后肿瘤对后续干预的反应较差，常导致猫的生活质量下降甚至死亡。
免疫治疗的兴起为肿瘤治疗带来了新希望，尤其是通过增强局部免疫反应以抑制肿瘤复发。本研究使用基因工程痘病毒载体ALVAC（源自金丝雀痘病毒）和NYVAC（源自牛痘病毒），分别携带猫白介素-2（IL2）和人IL2基因，探索其在FFS免疫治疗中的效果。IL2是一种重要的免疫调节因子，能够激活天然杀伤细胞（NK细胞）和T淋巴细胞，从而诱导抗肿瘤免疫反应。
方法与实验设计
- 实验动物
- 研究对象为54只确诊为纤维肉瘤的欧洲家猫，性别均衡（27只雄性，27只雌性），且大多数为绝育猫（25只雄性和22只雌性）。
- 所有猫的纤维肉瘤均经手术切除和组织病理学确诊，且未发现远处转移。
- 分组与治疗
- 猫随机分为三组（每组18只）：
- 对照组：仅接受手术切除和铱-192近距离放疗，不使用任何免疫治疗。
- ALVAC-fIL2组：接受手术和放疗后，在肿瘤床内皮下注射ALVAC载体（携带猫IL2基因）。
- NYVAC-hIL2组：同样接受手术和放疗后，在肿瘤床内皮下注射NYVAC载体（携带人IL2基因）。
- 猫随机分为三组（每组18只）：
- 病毒载体与给药方案
- 病毒载体：ALVAC和NYVAC均为高度减毒的痘病毒，能够高效表达插入基因（如IL2）但不在哺乳动物细胞中复制。
- 给药频率：每只猫接受7次注射，前两次分别在治疗第1天和第5天进行，之后每周注射一次，持续8周。
- 疗效评估
- 肿瘤复发率：通过定期临床检查评估12个月内肿瘤是否复发。
- 生存率：记录治疗后14个月内的猫存活情况。
- 局部炎症反应：监测注射部位的短期炎症反应和耐受性。
结果
- 肿瘤复发率
- 对照组的肿瘤复发率为61%（18只猫中有11只复发）。
- ALVAC-fIL2组的复发率降至28%（18只猫中有5只复发），NYVAC-hIL2组为39%（18只猫中有7只复发）。
- 两种病毒载体在复发率上的差异无统计学显著性（P>0.05），但两者均显著优于对照组（P<0.01）。
- 生存率
- 所有治疗组的平均生存时间均为14个月以上，三组之间无显著差异。
- 尽管复发率显著下降，但复发后患者的生存期未能显著延长。
- 局部反应与安全性
- 所有治疗均耐受性良好，仅观察到轻度局部炎症反应（如注射部位红肿），通常在数天内自行消退，无系统性副作用。
- 病毒分布与IL2表达
- 痘病毒在注射部位高度局限，未检测到其向周围组织或血液扩散。
- 在注射部位IL2基因表达高峰出现在注射后4天，并在随后逐渐下降。
讨论
本研究证实了ALVAC和NYVAC痘病毒载体在FFS局部免疫治疗中的潜力。相比单纯的手术切除和放疗，IL2基因的局部表达显著降低了肿瘤复发率，这可能归因于IL2激活的肿瘤特异性免疫反应，包括T细胞和NK细胞的募集与激活。此外，局部注射避免了全身系统毒性，为肿瘤免疫治疗提供了一种低风险的策略。
虽然两种载体在降低复发率上表现相似，但由于ALVAC更专一于哺乳动物细胞的局限性，其安全性略优于NYVAC。这为ALVAC在其他类型癌症的临床转化提供了重要依据。
然而，研究也显示，仅靠IL2基因治疗无法显著提高生存率，提示需联合其他治疗方法（如肿瘤疫苗或放疗增强剂）以进一步提高疗效。
结论
ALVAC和NYVAC基因工程载体通过局部表达IL2显著降低了猫自发性纤维肉瘤的复发率，同时展现出良好的安全性和耐受性。这一研究为基因载体在宠物癌症中的应用提供了强有力的支持，并为人类癌症的局部免疫治疗开发提供了重要的参考。未来研究可探索与其他免疫调节剂的联合应用，以进一步提高治疗效果。
参考文献：
Local immunotherapy of spontaneous feline fibrosarcomas using recombinant poxviruses expressing interleukin 2 (IL2)