炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease, IBD）是一种涉及复杂免疫反应和肠道菌群失衡的慢性疾病。其病理特征包括肠黏膜的慢性炎症、组织损伤以及肠道功能障碍。在研究人类IBD的过程中，动物模型的建立成为研究疾病机制和探索新型治疗方法的重要工具。尽管小鼠模型在IBD研究中广泛应用，但猫因其胃肠解剖结构和免疫特性更接近人类，是研究IBD病理机制的理想模型动物。本文将详细介绍如何利用右旋糖酐硫酸钠（DSS）建立猫IBD模型，从实验设计、操作步骤到评估指标，提供规范的操作指南。
材料与方法
1. 实验动物与分组
- 实验对象：选用短毛家猫，体重接近，健康状态良好，适应性饲养一周后开始实验。
- 分组：实验分为以下三组：
- 对照组（C组）：正常饮用水。
- DSS诱导组（D组）：饮用含3%DSS的溶液。
- 治疗组（根据研究目的可加入，例如DSS+MSC）。
2. DSS诱导的模型构建
- DSS处理周期：
- 使用3%的DSS溶液诱导IBD样结肠炎，每次连续饮用7天，随后一周普通饮水，形成周期性暴露。整个实验周期持续4周。
- DSS溶液应每日新鲜配置，使用优质水以确保实验条件一致。
- 饮水管理：确保所有实验动物自由饮用溶液，但需密切监控每日饮用量。
3. 日常监测与记录
- 体重监测：每2-3天测量一次体重，评估因DSS导致的体重变化。
- 粪便评分：每日观察粪便外观并评分（评分标准：0为正常，1为软便，2为水样便，3为带血水样便）。此指标可反映炎症严重程度和疾病进展。
模型评估方法
1. 磁共振成像（MRI）
- 准备工作：实验结束后，所有猫禁食12小时以减少肠内容物干扰。使用异氟醚维持全身麻醉，并进行生命体征监测。
- 扫描参数：采用1.5特斯拉磁共振扫描仪，进行横断面T2加权成像，评估结肠壁厚度和炎症程度。MRI可提供精确的结肠结构变化数据。
2. 内窥镜检查
- 操作过程：猫经麻醉后，用柔性视频内窥镜检查结肠黏膜情况。插入内窥镜前，可用温盐水灌肠清理肠内容物，确保视野清晰。
- 观察指标：记录结肠黏膜的溃疡、出血及炎症情况，并采集可疑病灶部位的组织活检。
3. 组织学分析
- 组织采样：通过手术取下结肠组织，固定在4%多聚甲醛溶液中24小时，石蜡包埋并切片。
- 染色方法：HE染色用于观察组织结构，评估黏膜损伤和炎症细胞浸润程度。
4. 炎症标志物检测
- 血清检测：采集血液样本，使用ELISA试剂盒检测IL-1β、TNF-α和IL-6的水平。这些促炎细胞因子是衡量炎症活动性的关键指标。
5. 肠道菌群分析
- 样本处理：收集粪便样本，利用16S rDNA测序技术分析肠道菌群的α多样性（物种丰富度）和β多样性（群落组成差异）。
- 数据分析：通过群落热图和主成分分析（PCA），评估菌群的变化及其与炎症的相关性。
总结
通过周期性DSS处理，能够成功建立再现IBD关键病理特征的猫炎症性肠病模型。该模型表现出显著的体重下降、粪便异常、结肠壁增厚及黏膜损伤，具有良好的稳定性和可重复性。结合MRI、内窥镜和组织学分析，可全面评估模型的病理状态，为研究IBD机制及开发新型治疗策略提供了可靠平台。此外，该模型的构建方法简单高效，可在更大范围内推广应用以支持相关研究。
参考文献：
Mesenchymal stem cells: a novel therapeutic approach for feline inflammatory bowel disease